cpv细小试纸怎么用?
Ct和Cpv是检测猫瘟的两种不同方式,目前来讲,更推荐用CT来检测 将采样棉签置于盛有清水的容器内浸泡,注意保证棉签全部浸没在水中。
静置24小时,观察液体是否变为浑浊,如果变为浑浊则为阳性,说明猫咪感染了细小病毒,如果没有变化为阴性。 由于粪便样本容易受到外界细菌污染,且粪便中病毒含量较低,检测时易假阴性;而口腔刷毛取样方法相对固定,不易被操作人员携带自身菌株而导致实验结果假阳性,并且能够获得较高滴度病毒颗粒,利于实验进行。本实验采用口腔刷毛取样,检测血清中CPV抗体。
一、实验试剂 1.琼脂糖粉:上海生物工程有限公司产品(批号201637) 2.EB溶液:北京鼎国昌盛生物技术责任公司产品(批号160805) 3.Tag酶及dNTPs:宝生物工程(大连)有限公司产品(批号49527,D202-02) 4.引物:上海生工生物工程有限公司合成(序列如下) 二、实验步骤 1.模板DNA的提取 取约0.5g口腔颊部粘膜细丝,加到3ml含1%Triton X-100 的PBS缓冲液(pH=7.4)中,研磨成糊状。
将上述混匀的样品转入1.5ml Eppendorf管中,加入20ul蛋白酶K(50mg/ml),50℃水浴振荡过夜。 三、实验结果判断 根据所测抗体的滴度分为4个等级:
四、注意事项 1.实验必须使用洁净、干燥、密闭的器皿,所有器皿均经高压蒸汽灭菌处理。 2.在加样过程中,各试剂之间应避免相互干扰,尤其是dNTPs与引物不能接触金属器具或沾有肥皂的水洗剂等物质,以免产生非特异性扩增反应。